简述植物组织培养的步骤
植物组织培养方法
1
MS培养基的制备包括以下步骤。
培养基母液的制备和保存
MS培养基含有近30种营养成分。为了避免每次配制培养基都要称量这几十种成分，可以将培养基中的各种成分按照原来量的20倍或200倍分别称量，配制成浓缩液，称为培养基母液。这样，每次使用时，1/20(50
mL)或1/200(5
mL)并用水稀释以制备培养液。列出配制培养基母液所需的各种物质的量，以备配制。
常量元素(母液ⅰ)mg/l nh4no 3 33 000 kno 3 7 400 kh2po 4 3 400微量元素(母液ⅱ)znso 4·7h2o 1 720 na 2 moo 4·2h2o 50 cuso 4·5h2o 5 560 Na2-EDTA·2h2o 7 460有机成分(母液ⅳ盐酸吡哆醇(维生素B6)
100
盐酸硫胺素(维生素B1)甘氨酸400。
所有上述母液应单独制成1
l原液。其中，母液I、母液II和母液IV的制备方法如下:称取各母液中的几种成分后，用少量蒸馏水完全溶解，然后混合溶解，最后定容至1升
母液ⅲ的制备方法如下:将称取的FeSO4 7H2O和Na2-EDTA·2H2O投入450
毫升蒸馏水， 持续搅拌，同时加热使其溶解，然后混合两种溶液，将pH值调节至5.5，最后将体积调节至1 l
各种母液配制后，应存放在玻璃瓶中，贴上母液编号、配制倍数、日期等标签。 ，并存放在冷藏室的冰箱里。需要将植物生长调节剂如2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-d)、萘乙酸(NAA)和6-苄基嘌呤(6BA)添加到MS培养基中，母液(0.1
毫克/毫升)应分别配制。制备方法如下:称取10
mg这三种物质，用少量(1
mL)无水乙醇，并使用少量(1
mL)浓度为0.1的6BA。
制备培养液
用量筒或移液管从各种母液中取出所需的量:母液I为50毫升，母液II、III、IV A和IV B分别为5毫升。然后服用2，4-滴5毫升和NAA
一
mL，与各种母液一起放入烧杯中。
配制培养液时应注意:①使用事先配制好的母液时，在计量各种母液前，应轻轻摇动装有母液的瓶子。如发现瓶内有沉淀物、悬浮物或微生物污染，应立即消除母液，重新配制；②在用量筒或移液管测量培养基母液之前，量筒或移液管必须用被测母液润湿和洗涤两次；(3)测量母液时，最好将各种母液按被测顺序写在纸上，测一个，划掉一个，以免出错。
溶解琼脂
称量琼脂9
g和蒸馏糖30
g用一个粗略的天平，把它们摆成1
000
毫升搪瓷量杯。然后将配制好的混合培养液加入煮沸的琼脂中，最后加入蒸馏水定容至1
000
毫升，并搅拌均匀。
调节pH值
吸收浓度为1的NaOH溶液
mol/L用滴管，边搅拌边滴入溶解的培养基中，随时用精密的pH试纸(5.4~7.0)测量培养基的pH值，直至培养基的pH值为5.8(直至培养基的pH值为5.8)。
2
BA是细胞分裂素
NAA
是一种生长素
3
还没有找到适合百合根的激素。结果表明
:中型MS
+BA
0 1毫克/升+NAA 1。女士
+Ba
0
5mg/l+NAA 1适合增殖培养，有利于愈伤组织的产生。生根培养基是1/2 ms+NAA 1 0mg/l+多效唑。试管苗的根长为20cm时，移栽易成活
1cm
当它含有1毫克IAA时，为1毫克。6
0
0
m g/l ch
MS培养基
30
d文化。在含有以下物质的介质中
0 . 1m g/。一
m
g/
L
Ba可以形成浅绿色的愈伤组织，这些愈伤组织可以转移到。生根和移栽后不定芽的成活率
可以达到90以上
%
植物组织培养的两个过程是什么
植物组织培养包括两个过程，脱分化和再分化。
1.外植体(培养的组织块-叶碎片、茎尖、幼胚等。或细胞-去壁叶肉细胞)恢复分裂并形成大量细胞-愈伤组织。这个过程就是去分化。因为成熟细胞脱离了成熟细胞的状态，回到了类似胚胎期的状态，所以叫去分化。
2.诱导愈伤组织细胞分化成根、茎、叶等器官，甚至形成类似种子中胚胎的胚状体(体细胞胚)。这个过程叫做再分化。
植物组织培养的一般过程
植物组织培养可分为四个阶段:
(1)无菌体系的建立，即将外植体和培养基消毒接种，获得愈伤组织或器官。
(2)增殖，不断分化产生新植株，或直接产生不定芽和胚状体，或根据需要反复继代培养，达到大量繁殖的目的。
(3)转移植物进行生根培养，可转移到生根培养基中或直接扦插生根。
(4)试管苗的过渡，即试管苗从瓶内取出后，在一定时间内适应外界环境的过程。
什么是植物组织培养的过程
植物组织培养可分为四个阶段:
(1)建立无菌体系，即将外植体和培养基灭菌接种，获得愈伤组织或器官。
(2)增殖，不断分化产生新植株，或直接产生不定芽和胚状体，或根据需要反复继代培养，达到大量繁殖的目的。
(3)转移植物进行生根培养，可转移到生根培养基中或直接扦插生根。
(4)试管苗的过渡，即试管苗从瓶内取出后，在一定时间内适应外界环境的过程。
